细胞直接计数

细胞浓度的定量

培养基中细胞浓度的定量对于微生物生长动力学和计量学的确定有
着至关重要的作用。细胞浓度量化的方法可分为两类：直接法和间接法
。在许多情况下，由于培养基中悬浮的固体或者其他干扰物质的存在，
不能采用直接法。测量细胞的数量还是测量细胞的质量取决于所需信息
的类型和体系的性质。当只需测一种浓度时，通常优先选择测细胞质量
浓度，但通常希望两种浓度都测量。

细胞数量浓度的测定

Petroff—Hausser载玻片或血细胞计数器常用于细胞的直接计数。
在这种方法中，经校准的方格置于培养室的上方，通过显微镜对每个方
格中的细胞进行计数。为了进行可靠的统计，至少要对20个方格的细胞
进行计数并取平均值。培养基必须清洁且无颗粒，因为颗粒会遮蔽细胞
或与细胞混淆。可以通过染色区分死细胞与活细胞。这种方法适合非聚
集的培养。由于具有形成菌丝体的特性，这种方法难以用于霉菌的计数
。

含有适当培养基的琼脂凝胶平板(培养皿)用于活细胞的计数(本文
中“活”的意思是指具有繁殖能力)。培养样品稀释后涂布于琼脂表面
，进而对这些平板进行培养。在培养期琼脂表面的菌落进行计数。结果
用菌落形成单位表示。如果细胞形成聚集体，那么一个单菌落就可能不
是由单个细胞形成的。这种平板计数法更适合于细菌和酵母菌的计数，
但不太适合霉菌的计数。必须对大量的菌落进行计数才能得到统计学上
可靠的结果。由于一些培养基比另一些培养基更有利于生长，因此必须
仔细选择培养基。活细胞数可能变化，这取决于培养基的组成。从单个
细胞开始，可能需要繁殖25代才能形成一个容易观察的菌落。除非选择
合适的培养基和培养条件，否则即使有代谢活力的细胞也可能不形成菌
落。

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