固体培养基的配制

固体培养基的配制-培养基观察分析显微镜

  固体培养基的配制
  配制固体培养基时，先配好相应的液体培养基，然后加入适量
的琼脂(鞘)(如按琼脂质量百分比浓度1％～1．5％添加)，用玻
璃棒搅拌混匀，灭菌。
  培养基配好后，要马上灭菌，否则会生长微生物，消耗培养基。
有些营养成分如维生素、抗生素等，要等到培养基冷到适当温度时
在无菌条件下加入，否则会因温度高破坏这些活性成分。
  培养基的分装
  根据不同需要，可将已配好的培养基分装入试管或锥形瓶内。
  1．培养基分装于试管
  用移液管取适量的培养基转移到各试管中。装入试管培养基
的量依目的而定，一般液体培养基可分装至试管体积的1／4左右。
对于从大肠杆菌提取质粒的实验，可以把液体培养基等分分装于
1．5～2mL的一次性小塑料离心管中，在接种了细菌后，盖好这些
小塑料离心管，置于锥形瓶中摇荡，以培养这些细菌。分装固体或
半固体培养基时，对于琼脂培养基，水浴加热至琼脂全部融化，在
不少实验室，加热用微波炉完成。在琼脂完全融化后，应趁热(约
45℃时)分装于试管中。一般用于制作斜面的固体培养基分装量
为试管体积的1／5，半固体培养基分装量为试管体积的1／3。
  培养基分装于锥形瓶
  用于摇荡培养微生物用时，一般在锥形瓶中加入1／5体积的
液体培养基。用于制作平板培养基用时，在250mL锥形瓶中加入
150mL培养基，然后再加入2．29琼脂粉(按质量百分比1．5％计
算)。灭菌时琼脂粉被融化，灭菌后琼脂培养基适当冷却，趁热(约
45℃时)分装于需要的容器(如培养皿)。
  (四)棉塞的制作及试管、锥形瓶的包扎
  为了培养好气性微生物，需提供优良的通气条件，同时为防止
其它微生物污染，应该让进入试管或锥形瓶内的空气通过一道过
滤屏障，通常方法是在试管及锥形瓶口加上棉塞等。当用一次性
锡纸时，由于锡纸具有良好的成形性，所以用二层锡纸包住瓶口
(或管口)即可。

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