相衬显微镜用特殊聚光器和物镜来强化生物不同结构

相差显微镜

许多染料都会杀死微生物，因而多数微生物活体无法进行染色观察
。不经染色就观察活菌体则需要采用相差显微镜(Phase-contrast micr
oscopy)技术。相差显微镜用特殊的聚光器和物镜来强化生物不同结构
的折射率差异。光通过具有不同折射率的物体时会减速并发生衍射。不
同介质中光速的差异就会导致亮度的不同。诺尔马斯基(微分干涉差)显
微镜

和相差显微镜一样，诺尔马斯基显微镜(Nomarskimicroscopy)也是
利用折射率的差异来观察未染色细胞及其结构。但微分干涉差显微镜的
分辨率比标准相差显微镜更高。由于景深(始终处于焦距的标本厚度)很
小，它能产生近乎三维的图像。

荧光显微镜

荧光显微镜(Fluorescence microscopy)利用紫外线照射激发分子
，使其释放出波长比入射光更长的光。不同波长的光呈现出不同亮度的
橙色，黄色或黄绿色。有些微生物，如假单胞菌(Pseudo一17zonas)，
受紫外线照射时会自然发出荧光。而另外一些微生物，如结核分支杆菌
(Mycobacterium tuberculosis)和苍白密螺旋体(Treponema pallidum
，梅毒病原菌)，必须经发荧光的染料即荧光染料(fluorochrome)处理
后，它们才能在黑色背景下突现出来。吖啶橙是一种能结合核酸的荧光
染料，根据荧光显微镜滤光系统不同，它呈现出明亮的绿色、橙绿色或
黄色。有时，它被用来监测样品中的微生物生长，它与活细胞结合会发
出明亮的橙光或绿光。

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