固定体积培养介质细胞悬浮培养实验图像显微镜

固定体积培养介质细胞悬浮培养实验图像显微镜

  悬浮培养的类型
  分批培养
分批培养指在固定体积的培养介质中进行的细胞悬浮培养。在培养
过程中？细胞分裂和细胞生长使得悬浮培养物的生物量不断增加。当培
养环境(可利用的营养和氧气)中出现限制因子时，细胞停止生长，生物
量便不再增加。

  培养时间的模式曲线
  ①滞后期：此期为细胞分裂做准备。
  ②指数期：细胞分裂速度最快。
  ③线形期：细胞分裂速度减慢，细胞伸长生长速度增加。
  ④减速期：细胞分裂和细胞伸长速率都减小。
  ⑤稳定期：细胞数目和大小保持恒定。
当细胞被转移到新鲜培养基中开始培养时，细胞就处于滞后期，这
是分批培养的最开始阶段，此时期的细胞还没有分裂。滞后期的细胞可
用来分析特定代谢物的合成和某种生理活动的速率。紧跟滞后期的是细
胞分裂期(即指数期)，此时期持续的时间很短，指数期时，每单位生物
量浓度的生物量增加是一定的且是可以测量的。生物量通常是指每毫升
培养物中的细胞数目。一般地，在细胞分裂到3—4代后，细胞生长开始
降低，最后，细胞数目达到稳定期，此时细胞干重开始下降。稳定期是
分批培养中细胞生长周期的最后阶段，此时生物量和细胞数量都没见有
明显的增加。培养时可以通过频繁(周期为2—3d)地进行亚培养而使细
胞维持在指数生长期。由于细胞能利用胞内的储备物和死亡细胞所释放
的可再利用代谢物，所以细胞可以存活几天。稳定期细胞的稳定性取决
于生长限制因子的种类和特点(如因氮缺乏而达稳定期的细胞的存活时
间比碳缺乏的要长)。处于稳定期的细胞被转移人新的培养基进行继代
培养后，细胞就依次通过滞后期、很短暂的指数生长期、相对生长速率
下降时期，接着又再次进入稳定期。进入末期前，细胞的体积在增大。
一般按照惯例，每次继代培养都是开始于相对较高的细胞密度，所以再
次进入稳定期前，细胞只进行有限的分裂(细胞数目加倍)。

一般来说，细胞悬浮培养的目的是获得生长速率较快、均一的细胞
，而且所有细胞都是活的。在适当的培养基中频繁地进行继代培养，获
得的细胞就可以同时具有这些特点。如果悬浮培养的细胞是用于做实验
，则继代培养的时间间隔不要超过一周。

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