微生物细胞化学物质的纯DNA样品测定显微镜

微生物细胞化学物质的纯DNA样品测定显微镜

生物学和分子遗传学的认识依赖于合适的研究工具的发展。对于核
酸是怎样发挥功能的知识方面的进展一般与研究新方法的发展密切
相关。在此我们讨论一些方法。
  1．DNA的提取和纯化。首先需要没有其他细胞化学物质的纯DN
A样品。这个过程就是我们要说的DNA的纯化。最后一步的水溶液用
RNAase处理以便除去RNA。蛋白质的去除是用变性溶液(通常是酚)
，通过几次重复纯化步骤，可以得到实质上很纯的DNA溶液，而不
合任何其他杂质。
  所得到的DNA溶液不是DNA分子在细胞中的天然长度。纯化过程
会引起DNA的断裂，  而形成各种长度的片段(无规则的)。如果在
纯化过程中动作缓和，DNA片段的长度大约是完整染色体长度的百
分之一。
  2．DNA的测定。有一些方法可用于溶液中DNA含量的测定， 
一个应用最广泛的方法是测溶液的紫外光吸收值，DNA在波长260nm
处有很强的紫外光吸收能力。这种吸收作用是由于嘌吟和嘧啶碱基
的存在。弱，这是由于双股DNA中两个对应链上的碱基之间相互作
用  (氢键)减弱了对紫外光的吸收。
  3．DNA的密度梯度离心。DNA分子密度取决于分子内精确的化
学成分

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