菌种斜面培养和平板培养技术

菌种斜面培养和平板培养技术-菌种鉴别技术

1．斜面培养  将培养基注入试管中，灭菌后摆成斜面，可较长期
贮存备用。在出外采集虫尸样本时，可用小试管携带一些选择性培养基
，随时进行分离。接种时斜面试管上贴上标签，注明接种菌名称、日期
、接种人姓名等。斜面培养还是菌种保藏及运输邮寄的方便方法，它封
闭严密，易避免杂菌污染。

2．平板培养  平板培养是将溶化冷却到45—50℃的琼脂培养基注
入灭菌的培养皿中，直径9—1cm的培养皿注入12—15mL。轻轻转动培
养皿，使之均匀分布，凝固后即成平板。接种好的平板，为防止水分蒸
发，要翻转倒置于恒温箱中培养，多数虫生真菌不要求高温，一般在25
=C左右为宜，培养5天以后再行观察。

根据培养目的不同，接种方法也不同，为观察菌落形态或测定菌落
直径生长量应采取点植培养，通常自斜面上蘸取极少量孢子，点植于皿
的中心或成三角形的3点。为分离菌种则采用划线分离培养和稀释分离
培养。为计数活孢子数量，则采用稀释接种培养。

稀释接种培养方法有两种，即基内接种和表面接种，基内接种是将
相应稀释倍数的菌液1mI，用灭菌吸管先置于灭菌皿中，再把溶化冷却
到50℃的琼脂培养基注入，迅速摇动混合均匀(顺时、逆时方向各10次)
，凝固后培养。表面接种是把0．1ml或0．2ml的相应菌悬液接种于平板
表面，再用玻璃刮铲涂布均匀，培养后计数。

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