视频光学电子显微镜分析细胞内复合形态的动态结构

视频光学电子显微镜分析细胞内复合形态的动态结构

  低温免疫金电子显微镜术可在亚细胞水平检测抗原，具有分辨
率高的特性。本技术涉及细胞或组织超薄冰冻切片的制备，并用免
疫金标记切片以定位抗原。由于不需要苛刻的有机溶剂如用于可塑
性包埋的有机溶剂，蛋白质抗原特性与精细超微结构的保持比传统
的电镜包埋法好。低温免疫金标记时，葡萄球菌蛋白A结合的不同
大小的金粒子可用于标记与抗原结合的不同抗体，故可同时定位多
种抗原，而其他免疫电子显微镜术标记法则不能同时定位多种抗原
。如何运用低温免疫金电子显微镜术标记标本，包括固定、包埋、
冰冻切片及标记。
  视频光学／电子显微镜术(CVLEM)，它集荧光显微镜术和电子
显微镜术于一身，用于分析细胞内具有复合形态的动态结构。该技
术通过监测表达荧光报告蛋白的细胞，如表达绿色荧光蛋白嵌合体
的细胞，来鉴定和监测感兴趣的结构。首先固定细胞，然后用电子
显微镜通过三维结构重建的方法来分析同一个感兴趣的结构。在标
本制备的各个阶段，都有一定的技术要求。而该技术能以惊人的高
分辨率检测细胞内复合结构的组织及形态，如Golgi复合体、膜转
运介质及细胞骨架成分。

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