光学显微镜细胞形态的图像质量定量分析实验

光学显微镜细胞形态的图像质量定量分析实验

  组织切片制作方法
  组织切片制作方法与非切片制作方法的最大区别是利用切片机
制作出相应的标本切片。制作的切片包括：石蜡切片、火棉胶切片
、冰冻切片、树脂切片、碳蜡切片、电镜超薄切片等。
  切片类型的确定主要是依据标本内支持物的种类，如石蜡切片
，其标本内的支持物为石蜡，石蜡填充于标本内的各个空间。因此
，石蜡切片实际上就是切带有标本材料的石蜡，因为标本与石蜡已
经融为了一个整体。同理，冰冻切片的支持物是冰，电镜超薄切片
的支持物就是环氧树脂。目前，最常用的切片种类是石蜡切片、冰
冻切片、树脂切片、电镜超薄切片。

石蜡切片制作过程总体上可概括为9个步骤：取材、固定、脱水、
透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封固。制作过程中的每个环节都
是相互关联的，一个环节出了差错，必将会对后续环节的操作产生
负面影响，并有可能最终导致光镜下组织或细胞形态结构观察的偏
差或失败。
  取材是指从人体或实验动物体内取下所需观察的组织材料的过
程。
  标本主要来源于临床活体检查、临床手术切除、实验动物模型
以及病理解剖等途径。取材的标本要求均为新鲜组织。离体或机体
死亡大于两小时以上的标本材料，其内部可能会出现不同程度的自
溶，严重者甚至会出现细胞的弥散与溶解现象。因此，标本的取材
是标本样品制备过程的第一步，取材是否科学、是否符合实验要求
，将直接关系到光镜下组织细胞形态的观察质量。
  做好标本取材前的各项准备工作是保障取材过程顺利进行的前
提。取材过程中所使用的各种器械(解剖剪、手术刀片等)是否锋利
，固定剂的配制与固定容器的选择是否恰当，以及其他辅助性的取
材用具(卡片纸、软木片等)的准备是否充分等，都会直接影响标本
取材的过程。另外，实验动物处死方法的选用要恰当，避免动物濒
临死亡前的过度挣扎，否则会引起机体内缺氧时间过长而导致组织
或细胞结构的失常。
  总之，无论怎样实施标本取材的操作过程，其最终的要求就是
整个取材的过程应迅速、准确。

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