利用荧光显微镜检测荧光标记物

利用荧光显微镜检测荧光标记物-细菌显微镜

荧光抗体法
  荧光抗体法(fluorescent antibody，FA)自1942年创立发展以来，广
泛地应用于医学诊断和食品微生物检测。特定抗原的抗体与荧光物质相结
合而发出荧光，当抗体与抗原发生反应时，抗体一抗原复合体发出荧光，
利用荧光显微镜检测。荧光标记物通常是：罗丹明B(Rhodamine B)、荧光
异氰酸盐和荧光异硫代异氰酸盐；荧光异硫代异氰酸盐应用最为广泛。荧
光抗体(FA)技术可以采用两种基本的方-法：直接法是利用抗原与特异的带
有荧光物质抗体结合；间接法中同源抗体不与并不与荧光物质结合，而是
利用同源抗体的抗体(抗抗体)与荧光物质相连(抗原被同源抗体包围，同源
抗体又被其抗抗体包围，从而发出荧光)。在间接法标记物可以检测同源抗
体的存在，直接法中标记物检测抗原的存在。利用间接法不需要为每一待
检的微生物制备荧光抗体。如果使用H免疫血清，FA技术就不需要沙门氏菌
的春培养物。最常用的共价是多价沙门氏菌OH球蛋白，用荧光异硫代氰酸
盐标记用来检测A～Z组菌体抗原。由于沙门氏菌抗血清体可以与其他相关
微生物发生反应，(例如：亚利桑那菌(A—zo”以)、柠檬酸杆菌(Citrobac
ter)、大肠杆菌(E．coli))。
  因此，当检测自然污染食品时会出现假阳性的结果。CherrY和Moody[
州综述了FA技术在医学微生物的应用；

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