应用目镜测微尺测定分析显微镜

应用目镜测微尺测定分析显微镜-原生质测定实验

  当使用灌流小室时，所需的操作较为简单。先把组织放在盛有一滴矿
泉水的敞开的灌流小室中，当渗透小室密封后，为检验正常的灌流运行，
先用矿泉水灌流片刻，然后用渗透溶液(如1M的脲溶液)代替矿泉水，且选
择一个合适的细胞进行测定，该细胞的横向细胞壁必须完全平行。即使有
一点不平行，也将导致原生质长度和时间关系图的斜率发生改变，并使透
性常数产生偏差。只要原生质体末端是圆形的，在质壁分离复原之前，如
果可能的话，应用目镜测微尺在适当的时间间隔内测定记录原生质体的长
度

  用原生质测定法测定水分透性
  在许多生理过程中，活原生质对水的透性是一个非常重要的因素。原
生质透性的测定方法随实验条件和组织的不同而改变。测定质壁分离和质
壁分离复原可以进行水的绝对透性常数的计算，可直接与溶质的绝对透性
常数值相比较。
  水的透性实验装置和测定步骤与上面介绍的相同。基本概念是。当细
胞从一非透过溶液中突然转移到浓度相差较大的同样溶液中时，尽可能地
密切注意原生质体长度相应的快速变化。细胞液与新的外部溶液问的渗透
平衡建立的时间进程可用来计算水的透性常数。
  然而，这个平衡建立的时间进程也依赖于其它因素，如原生质粘度或
液泡内部的扩散阻力。在这些情况下，由于体积变化非常迅速，这些因素
比实验中所用的渗透物质的影响更明显。尽管这些因素使实验的复杂性增
加，当选用的材料合适时，用原生质测定法仍能得到很好的结果。用这种
方法所求得的水的绝对透性常数与在植物材料中用扩散方法测得的水的透
性常数值处于同一数量级，且与用各种实验方法在动物细胞中所测得结果
处于同一数量级。
  为了使实验结果更准确，使用缩时摄影技术可以更精确地建立原生质
体长度和时间的关系。就第二种处理溶液而言，既可使用高浓度，也可使
用低浓度。在高浓度溶液中发生部分质壁分离，而在低浓度溶液中发生质
壁分离复原。

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