快速学会使用荧光显微镜的方法

快速学会使用荧光显微镜的方法

有的朋友在使用荧光显微镜时候，由于没有弄懂原理，就盲目的去试验，最后找不到问题出在哪里因而变得沮丧，所以我在这里给大家讲一下原理，以后大家遇到荧光显微镜的问题就可以触类旁通了

先了解一下荧光的原理和性质，然后才能确认一下要使用的激发块的类型。
1、荧光原理是用短波长的光去激发标本，标本产生长波长的荧光。在光谱上，345nm是近紫外光（肉眼看不见），461nm是蓝色光，530nm是绿色光。

2、你染细胞核的DAPI染料应该用激发波长359nm的近紫外光去激发，选择吸收波长461nm的滤色镜去观察蓝色荧光。

3、你染细胞质的绿色染料应该用激发波长345nm的近紫外光去激发，选择吸收波长530nm的滤色镜去观察绿色荧光。

4、你需要确认一下你所使用的荧光激发块，一般荧光激发块有窄带和宽带两种。
1）如果你使用的近紫外激发块是宽带的，你在显微镜下应该可以同时看到蓝色的细胞核和绿色的细胞质！如果只有绿色细胞质，可能是你的激发块选错了，你可能选择了蓝光激发，所以只能看见绿色的细胞质。
2）如果你使用的近紫外激发块是窄带的，则你将只能看到蓝色或绿色中的一种，看你选什么波长激发了。

解决显微镜放大400倍才能发现细胞污染问题

那种做布朗运动的小黑点是产碱杆菌，感染后致细胞生长缓慢。一般在实验条件不严格的情况下，培养的细菌都会感染，在高倍显微镜下可见。其实在低倍下盯着细胞之间培基看也能看见小黑点。

其实在100×的倍数（甚至相差显微镜观察40×）下就可以发现了，特别是在姨酶消化后，感觉和细胞混杂在一块，特别脏，现在拿他们也没有办法了，

总结了两点：
1）有条件的把细胞扔掉，但不排除重新购买的细胞仍然有；还有就是没条件的不要管它，
2）我觉得一般的实验所收影响不是很大。据说用四环素可以杀灭焦虫

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