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普通荧光显微镜下怎样观测EGFP?

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-03-12  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:560

普通荧光显微镜下怎样观测EGFP? 
有的实验室可能只有普通的荧光显微镜,没有倒置的,那么怎样利用普通荧光显微镜也可以观测EGFP的基因转染入HepG2细胞呢?

  1)可以考虑载体表达完毕后(一般是转染结束后24-72小时),将细胞固定,染色之,并加盖封片剂,在细胞顶面加上盖玻片制成可长期保存的细胞样本。
  这样即可用于正置荧光显微镜的观察。且盖玻片厚度小,甚至可以用工作距离很小的物镜(如100x oil)进行观察。

  推荐大家使用35mm培养皿,比较容易操作。在制片的时候还可以吧皿壁完全去除,这样就能同时满足正置、倒置显微镜的观察需要。
  2)还有一种比较快捷的办法,只要将片子用PBS洗三遍,然后粘在载玻片上,上面用50%PBS+50%甘油封片,就可以了,在荧光显微镜下激发可看,记得不要调错激发光

本文显微镜信息转载于http://www.xianweijing.org/显微镜百科

 

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