单细胞铺板的三种技巧

    单细胞铺板手法一：均匀单层。要铺成那种很均匀的单层细胞，手法如下：    1，细胞板子先加入一定量(一般是总量培养基的1/5)的培养基，放入孵箱中放置10-20min。    2，在滴入细胞时，细胞板子与通风橱有一定的角度，沿着板壁的孔边缘滴入。    3，滴入后，呈 8 字方法摇晃5-8次。    4，置于水平台上，放置10-20分钟    5，放入孵箱。在细胞铺板时，每一种板子的孔面积有多大，培养的液体量以及加入细胞量。    手法二：中间少，周围多。其实细胞铺板不一定都需要单个单个的那么均匀，比如，做免疫荧光时，学霸姐姐喜欢铺中间少，周围稍多的板子，因为这个样子可以同时检测到单个细胞的形态，另外又可以照一点低倍的用作于统计，所有的细胞都在一个环境中。    要铺这样的细胞样子，那铺细胞时要注意手法了：    1，细胞板子不需要提前用培养基润洗，直接从边上滴入混有细胞的培养基。    2，放置30s-1min后，前后摇晃5-8次。    3，放在水平台上静置2-5min。    4，放入孵箱。    其实在单细胞铺板的时候，你要准确的知道你所养的细胞的特性，比如：    1，细胞的名称，来源。2，细胞的属性。3，细胞分裂时间。    细胞铺板后，细胞状态不好怎么办？    如果出现这种情况，学霸姐姐建议你从以下几个方面考虑一下原因：     1，用来铺板的细胞状态本身就不好。2，用来铺板的细胞传代次数太多，有些老化。3，胰酶消化时间过长。4，中和的血清量及时间不够。5，支原体污染。    细胞铺板是一个经验积累的过程，你的手法也需要积极的改进，不要生搬硬套，也不要一味追求的铺均匀，在实验过程中多思考细胞本身的特征和属性，出现问题积极解决即可。