水在组织学实验中的应用

组织学是病理科研究的重要工具。它在诊断，癌症监测，其他疾病，以及病原体的检测和鉴定中发挥十分的关键作用。水是许多组 织学试剂和缓冲液的重要组成成分 1，用于漂洗和漂浮浴。质量差的水可能会产生人造物而影响染色结果，也会影响颜色密度，特 异性或减低化学染料的稳定性2，自来水可能会因季节不同而不同(pH，离子，有机物)，这也可能会对实验结果的重现性产生影响。 无论是去离子水和蒸馏水，购买的瓶装水还是从自来水生产，也可能在质量上有差异，并会随时间而变化。而现如今，组织学工作 者可以依靠多元化的水纯化技术得到稳定可靠的试剂水。 结果和讨论 在本研究中，我们比较了 Elix® 系统纯化水，反渗透，电流去离子和紫外技术，是否可以应用于组织学染色实验。 1. 特殊染色 一些特殊染色技术，如银染，因其对水中污染物非常敏感度而闻名 3，Grocott's 使用肺组织中肺囊虫的 GMS 染色证明。当使用 来自 Elix® 系统纯化水用于试剂的制备，没有任何背景噪音，能获得可靠的结果(图 1)。用 Elix® 系统纯化水可以代替蒸馏水或 去离子水用于 GMS 染色。 Figure 1. Photomicrographs of lung tissue with Pneumocystis jirovecii, stained with GMS stain. Methenamine silver nitrate solutions were prepared with (A) Elix® purified water, (B) distilled water, or (C) deionized water. Pictures courtesy of E. Macrea and W. Lange. 图 2 说明了水中杂质如金属，有机分子(腐殖酸，主要来源于自来水)，二氧化硅和细菌副产物(内毒素)对 GMS 染色的影响。 为了获得最佳效果，因此也建议使用不含这些杂质的纯净水。 Figure 2. Methenamine silver nitrate solutions were prepared with Elix® purified water and added contaminants: (D) chromium, (E) copper,(F) nickel, (G) humic acid, (H) silica, (I) endotoxin. Pictures courtesy of E. Macrea and W. Lange. 2. Hematoxylin and Eosin Stain H E 染色可能是组织学实验中使用最广泛的染色方法。 自来水可能由于其 pH 值的波动，而得到不稳定的蓝调，甚至可能含有 可能导致苏木精褪色的物质(铁，硫或氯)。 Elix® 系统纯化水代替所有漂洗步骤中的自来水，以及制备蓝染色的试剂，可以得到同等的染色特异性和颜色(图 3)。 Figure 3. Photomicrographs of tonsil tissue stained with H E. Rinsing steps and Scott’s tap water substitute prepared with (A) Elix® purified water or (B) Tap water. Pictures courtesy of E. Macrea and W. Lange. 实验步骤 Grocott's Methenamine Silver (GMS) Stain 使用商业化的GMS 试剂盒。 在第一个实验中，分别用蒸馏水，去离子水，Elix® 系统纯化水制备甲胺硝酸银溶液。 在第二个实验中， Elix® 水中掺入一些常见的污染物(金属：1 mg / L 硫酸铬钾，硫酸铜或硫酸镍 ; 有机分子：1mg / L 腐殖酸 ; 10ppm 硅酸钠 ; 细菌副产物：1000 EU / mL 内毒素)。 Hematoxylin and Eosin (H E) Stain H E 染色过程中几乎总是使用自来水用于苏木精前后的冲洗，分化和蓝染步骤。 在本研究中，所有的漂洗步骤，以及蓝染色溶 液的制备完全用自来水或来自 Elix® 系统的纯化水。 现代生物医学实验室使用的技术依靠高品质的试剂，以获得可靠和可重复的结果。如果水中含有干扰组织学实验的污染物：如离子 和金属，可能会影响pH 值并与染料相互作用; 有机物和内毒素，可能影响染色过程; 细菌和颗粒，可能沉积在载片上并产生人造物。 而结合几种水纯化技术(反渗透，电流去离子和紫外线)产生的纯水可以提供一致可靠的质量，适用于广泛的染色实验，如 H E 染色，银染。而且可以替代蒸馏水和去离子水在组织学中的应用，提供更高质量更可靠的结果，同时降低水中的污染物造成的风 险。最后，水纯化系统可以提供在线水质监测以及嵌入式 e-solution5 数据管理工具，确保数据的可靠性和可追溯性，是一个很 好实验室的资产，并提供 ISO®15189：2012.6 等标准的认证 For more information about hematology and histology, please visit http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-biology/hematology-and-histology.html Acknowledgments The authors thank Ethel Macrea, HT (ASCP) QIHC and Wendy Lange, HT (ASCP) for their technical expertise and support. References 1. J.D. Bancroft and M. Gamble; Theory and Practice of Histological Techniques, Churchill Livingstone Elsevier, 6th edition, (2008). 2. R.W. Guy, "The chemistry and electronic spectroscopy of dyes and stains" in Laboratory Histopathology: A Complete Reference, A. E. Woods, R. C. Ellis, Churchill Livingstone, (1994). 3. W.E. Grizzle, "Theory and Practice of Silver Staining in Histopathology," in Journal of Histotechnology (1996), 19:3, 183-195. 4. Guidelines for Hematoxylin Eosin staining. National Society for Histotechnology, 1973. Reviewed July 2001. 5. Millitrack? e-Solutions, A unique set of data management and monitoring software solutions for water purification systems, Merck; www.merckmillipore.com/millitrack-esolutions. 6. ISO? 15189: 2012 Medical laboratories – Requirements for quality and competence, http://www.iso.org.
我们是全球实验室纯水行业的引领者：我们旨在为实验室纯水用户提供前沿的纯水解决方案以满足用户的实验用水需求。