Gene Link寡核苷酸适用于要求苛刻的应用和一致的结果。我们认为,重视时间并且没有因寡核苷酸质量而导致实验失败的空间的研究人员应考虑使用Gene Link。我们针对每种寡核苷酸的众多质量控制步骤可确保您放心。
Gene Link Oligo合成部门不是 寡头工厂 。在合成过程中以及在通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行处理后,将对每个寡核苷酸进行严格监控。
基因链接专门研究长寡核苷酸。我们对长寡核苷酸的描述是180 mer至250 mer。邀请您进行比较。
GeneLink 未修饰的DNA寡核苷酸的价格表未修饰的寡核苷酸(每碱基价格)*产品50 nmol规模200 nmol规模1 u摩尔规模2 u摩尔规模10 u摩尔规模15 u摩尔规模货号26-6400-0526-6400-0226-6400-0126-6400-0326-6400-1026-6400-15未修饰的寡核苷酸$ 0.50$ 0.90$ 1.95$ 2.95$ 19.50$ 27.65最大合成长度80粒120粒200粒250粒250粒250粒*最低收费为15人
当天Oligo服务
当天Oligo服务$ 20.00每个寡头(必须在美国东部时间下午12点之前订购)
某些实验无法等待额外的一天。在这种情况下,请订购我们的Same Day Oligo服务。定制的oligo将在第二天上午或下午交付。订单应在美国东部标准时间中午12点之前收到;运送时间限制可能未提供胶凝图片。如果需要,将邮寄凝胶图片。需要确认。
凝胶纯化
如果应用将用于PCR或测序,则所有短于40 mer的Gene Link寡核苷酸都不需要进一步纯化。以99.5%的偶联效率合成的20 mer寡核苷酸将包含〜90%的全长20 mer和〜10%的截短序列的混合物。随着寡核苷酸长度的增加,即使在99.5%的偶联效率下,全长寡核苷酸的产量也会降低。60 mer原油产品将包含〜75%的全长寡核苷酸,同样,100 mer将包含〜60%。强烈建议对50 mer以上的寡核苷酸进行纯化。纯化(每个DNA寡核苷酸的价格)产品50 nmol规模200 nmol规模1 umol量表2 umol秤10 umol规模15 umol量表货号(PAGE)26-6400-7726-6400-7726-6400-5526-6400-8826-6400-4426-6400-99凝胶纯化(PAGE)75.0075.00150.00280.001500.001800.00货号(RPC)26-6400-1126-6400-1126-6400-2226-6400-2326-6400-3326-6400-34反相纯化(RPC)30.0030.0090.00170.00750.00900.00
未修饰的DNA寡核苷酸的合成规模和产率
寡核苷酸的合成规模和未修饰的DNA寡核苷酸的典型产量* 原油脱盐RPC纯化**凝胶纯化20 mer oligo
典型产量30 mer oligo
典型产量50 mer oligo
典型产量
规模
A 260伙
纳摩尔
毫克
A 260伙
纳摩尔
毫克
A 260伙
纳摩尔
毫克
50纳摩尔8-1030+0.2-0.34-512+0.1-0.16NR * [1-2]NR * [2-4]NR * [0.03-0.06]
200纳摩尔20-2580+0.6-0.88-1224+0.26-0.44-68+0.13-0.2
1 摩尔100-120400+3-440-5090+1.3-1.620-2540+0.6-0.8
2 摩尔200-240800+6-880-100180+2.5-3.140-5080+1.2-1.5
10 摩尔〜1000〜4000〜30〜400〜900〜10〜200〜400〜60
15 摩尔〜1500〜6000〜45〜600〜1350〜15〜300〜600〜90
纯度和产量
纯度大于80%
取决于寡核苷酸的序列和结构。有关寡核苷酸长度相关的纯度和产率,请参见偶联效率表。
PCR和测序应用无需进一步纯化。
凝胶纯化建议用于50 mer以上的寡核苷酸以及涉及克隆和诱变的所有应用。
** RPC是使用药筒进行的反相纯化;HPLC的替代品。
纯度85%至95%
取决于寡核苷酸序列和结构
GC含量高的序列的收率和纯度会更低
不建议用于35 mer以上的寡核苷酸。
** RPC是使用药筒进行的反相纯化;HPLC的替代品。
纯度98%至〜100%
取决于寡核苷酸序列和结构
随着寡核苷酸长度的增加,产量将逐渐降低。回文,发夹和高GC含量的寡核苷酸以及包含3个或更多G链的寡核苷酸会诱导强烈的二级结构和碱基堆积,从而降低纯度和产量。
*不推荐NR
*一种。表中列出的典型产量是未修饰的随机序列寡核苷酸。使用高GC含量的寡核苷酸和形成强二级结构的寡核苷酸可观察到产量降低。
b。改性寡核苷酸预期收率降低。减少百分比随修改类型和站点数量而变化。每个修饰位点的典型减少量为10%-20%。
C。对于约等摩尔的碱基组成,计算出的DNA寡核苷酸的产量为33 g / A260。单基或均聚物的长拉伸将具有可变的产率。均聚物20 mer的示例:dA(20)=〜25ug / A260单位;dC(20)=〜40ug / A260单位; dG(20)=〜32ug / A260单位和dT(20)=〜37 ug / A260单位
合成后修饰的共轭/转化(NHS,硫醇,马来酰亚胺等)的合成和产率规模
大多数寡核苷酸修饰都使用适合特定修饰的优化自动DNA合成方案直接偶联。最终产量有所不同,通常约为未修饰寡核苷酸产量的80%。同一寡核苷酸中的多个修饰和位点可能导致最终产量的进一步降低。
某些修饰(例如Alexa荧光染料,洋地黄毒苷等)不可用于直接自动修饰偶联化学,必须使用涉及氨基与NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)酯, 硫醇向马来酰亚胺的后合成方法和其他后合成转化方法进行缀合 。
这些合成后的共轭反应动力学可产生约60-85%的最终产物,建议使用聚丙烯酰胺凝胶纯化。这些合成后缀合的收率指南在下面列出。合成的低聚物规模和合成后修饰的典型产率*
(NHS,马来酰亚胺,碱转化等) RPC纯化**凝胶纯化20-40 mer oligo
典型产量20-40 mer oligo
典型产量
规模
A 260伙
纳摩尔
毫克
A 260伙
纳摩尔
毫克
50纳摩尔〜2〜4〜0.06〜1〜2〜0.03
200纳摩尔〜4〜8〜0.12〜2.5〜5〜0.07
1 摩尔〜12〜24〜0.36〜8〜16〜0.24
2 摩尔〜20〜40〜0.6〜15〜30〜0.45
10 摩尔〜100〜200〜3.0〜75〜150〜2.25
15 摩尔〜150〜300〜4.5〜112〜225〜3.36
纯度和产量
纯度60%至80%
取决于寡核苷酸序列和结构
GC含量高的序列的收率和纯度会更低
不建议用于35 mer以上的寡核苷酸。
** RPC是使用药筒进行的反相纯化;HPLC的替代品。
纯度85%至〜98%
取决于寡核苷酸序列和结构
随着寡核苷酸长度的增加,产量将逐渐降低。回文,发夹和高GC含量的寡核苷酸以及包含3个或更多G链的寡核苷酸会诱导强烈的二级结构和碱基堆积,从而降低纯度和产量。
*不推荐NR
*一种。使用高GC含量的寡核苷酸和形成强二级结构的寡核苷酸可观察到产量降低。
b。改性寡核苷酸预期收率降低。减少百分比随修改类型和站点数量而变化。每个修饰位点的典型减少量为10%-20%。
C。对于约等摩尔的碱基组成,计算出的DNA寡核苷酸的产量为33 g / A260。单基或均聚物的长拉伸将具有可变的产率。均聚物20 mer的示例:dA(20)=〜25ug / A260单位;dC(20)=〜40ug / A260单位; dG(20)=〜32ug / A260单位和dT(20)=〜37 ug / A260单位