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情况下毒素脾蛋白;NRK

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放大字体  缩小字体    发布日期:2021-01-27  来源:仪器网  作者:Mr liao  浏览次数:37
核心提示:公司产品采用干冰运输,经过逐步的降温,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暂时停止其生命活动,保存其活性,使您的实验更生动,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等国际品牌.产品名称生长特性货号正常

公司产品采用干冰运输,经过逐步的降温,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暂时停止其生命活动,保存其活性,使您的实验更生动,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等国际品牌.

产品名称

生长特性

货号

正常大鼠肾细胞;NRK-52E说明书

贴壁生长

CS-X8161

细胞名称 正常大鼠肾细胞;NRK-52E

形态特性  上皮细胞

生长特性 贴壁生长

特征特性  

培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  优质胎牛血清,5

传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。

传代情况 P(16+5)

冻存条件  完全培养基+8DMSO

细胞培养步骤:

一.正常大鼠肾细胞;NRK-52E说明书培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基,使293T细胞悬浮生长。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

以下是公司正在热销的产品:

ANKRD42 英文名称: 锚蛋白重复结构域蛋白42抗体 0.2ml

Anti-TRPV1/VR1 辣椒素受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit 人生长相关蛋白43Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Socs 3 细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗小鼠IgM 规格 0.1ml

sTfR(Human soluble transferrin receptor) ELISA Kit 人可溶性转铁蛋白受体 96T

NIR2 英文名称: 膜磷脂转移蛋白1抗体 0.2ml
正常大鼠肾细胞;NRK-52E说明书Rhesus antibody Rh phospho-SNAI2(Ser155+Ser158+Ser160+Tyr164+Tyr169) 磷酸化锌指转录因子Slug抗体 规格 0.1ml

Goat Anti-human IgM 羊抗人IgM (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg

Anti-phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC 荧光素标记抗磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea IgG/Gold 金标记兔抗豚鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies规格: 0.5ml

成纤维细胞生长因子受体4抗体 Anti-FGFR4 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗小鼠IgG 0.1ml

phospho-Fos B (Ser27) 英文名称: 磷酸化癌基因FOS蛋白B抗体 0.1ml
操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

 


 
 
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