BioGems试剂级重组人胰岛素产品特点
无血清和低血清培养基的必需添加物;
真核细胞重组表达,不含动物成分 (Animal Free);
生物活性与天然蛋白相同,批间稳定;
价格优势明显
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PeproTech/
BioGems
10-365-1g
Recombinant Human Insulin
重组人胰岛素
95%
1g/支
7000元
无血清培养基中应该添加试剂级别的重组人胰岛素,还是药物级别的重组人胰岛素?
因为胰岛素具有治疗糖尿病的重要功效,所以多年前就已被制备成药品,以供糖尿病患
者的使用。
药品确实具有制备严格(多数遵循 GMP 标准生产),副作用和安全风险小等优点,因此
许多无血清培养基生产厂家倾向于使用药物级别的胰岛素。然而,仍有不少厂家在使用试剂
级别的重组人胰岛素来生产无血清培养基。
那么,无血清培养基究竟是该用试剂级别的重组人胰岛素,还是药物级别的重组人胰岛
素呢?
表 3:试剂级别和药物级别重组人胰岛素的比较
试剂级别重组人胰岛素
药物级别重组人胰岛素
举例
重组人胰岛素
优泌林 70/30
诺和灵 30R
英文名
Recombinant Human Insulin
Humulin 70/30
Novomix30
生产厂家
PeproTech (BioGems)
礼来(Lilly)
诺和诺德(Novo Nordisk)
剂型
冻干粉 (不含任何添加物和赋形剂)
药用针剂 (液体)
药用针剂 (液体)
储存条件
-20 C
2-8 C
2-8 C
表达细胞
毕赤酵母
大肠杆菌
酿酒酵母
成分
重组人胰岛素
30%重组人胰岛素 70%精蛋白锌重组人胰岛素
30%可溶性胰岛素 70%低精蛋白锌胰岛素
辅料
无
甘油 磷酸氢二钠 硫酸鱼精蛋白 氧化锌 蒸馏间甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml)
甘油 磷酸氢二钠 硫酸鱼精蛋白 氯化锌 间甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml)
药品与试剂不同,药品有不同的剂型,如片剂、针剂、胶囊剂和栓剂等十多种。即使对
于同一种剂型,其中还可分为若干亚型,如针剂包括注射水针剂、注射油针剂、中草药注射
剂,以及注射用灭菌粉末等。而且药品通常保存于室温或 2 - 8 C。这就要求药品在制备过
程中除了包含药物本身(通常称为主药)外,还必须加入一些有助于制剂成型(如赋形剂)、稳
定(如抑菌剂)、增溶和助溶等具有不同作用的辅料,也就是说药品中含有很多非药品成分。
将药品添加入无血清培养基中进行细胞培养时,不可避免地会引入诸多不确定的因素,一方
面可能会对细胞的生长或分化产生影响,另一方面可能会带来非预期的实验结果。而药物辅
料对培养细胞的作用又很难通过设立辅料对照来确定,因为辅料的成分过于复杂,且通常药
厂并不公开辅料的具体组分。
下面我们以药物级别的重组人胰岛素为例来看一下辅料对体外细胞培养的可能影响。
表4:药物级别重组人胰岛素中的辅料
辅料
辅料在胰岛素药物中的功能
辅料对体外细胞培养的可能作用
甘油
稳定剂,增溶,调节渗透压和表面张力
对某些细胞具有细胞毒性和影响细胞 渗透压的作用[1]
磷酸氢二钠
调节 pH 值
无
硫酸鱼精蛋白
调节胰岛素在体内的释放速度(缓释剂)
对某些细胞具有抑制增殖的作用[2]
氧化锌
沉淀稳定剂,促使重组人胰岛素形成六 面体的结晶型沉淀
对细胞具有较强的基因毒性和细胞毒 性[3]。
间甲酚
抑菌剂(防腐剂)
具有细胞毒性,可致细胞凋亡和 DNA 损伤[4]
与白蛋白(albumin)和明胶(gelatin) 不兼容,会形成沉淀[5]
苯酚
抑菌剂(防腐剂)
从上表可以看出,胰岛素药物中的辅料均具有一定的负面生物学功能,这些功能在药物
用于人体内治疗时不会显现,因为人体具有肝脏等解毒器官,低浓度的有害物质短期内不会
对人体的组织产生影响。但当药物用于体外细胞培养时,因为药物中的辅料会直接、完全地
作用于细胞,这些辅料的副作用更容易显现出来。虽然当药物加入细胞培养体系时,辅料的
浓度可能已经降得很低,但不排除这些辅料或多或少仍会对细胞的生长或分化产生某些影响。
另外,无血清培养基体系中所必须添加的组分-白蛋白(albumin)与胰岛素药物中的辅
料-苯酚和间甲酚会形成沉淀,从而在一定程度上影响白蛋白的功能。其实,已经证实苯酚
的衍生物 - 酚红(phenol red)有干扰某些细胞的克隆性生长的作用,所以用于培养干细胞或
生长密度比较低的细胞的无血清培养基中通常不添加酚红,尽管培养基中因此会缺少酸碱指
示剂。
综上所述,配制用于体外细胞培养的无血清培养基使用不含任何辅料的试剂级别胰
岛素,以避免辅料可能给细胞带来的危害以及实验结果不确定性的增加。
参考文献
[1] Armitage WJ and Mazur P. Toxic and osmotic effects of glycerol on human granulocytes. Am J
Physiol. 1984;247(5 Pt 1):C382-9.
[2] Leibovich SJ and Polverini PJ. Protamine sulfate inhibition of serum-induced mitogenic responses:
differential effects on normal and neoplastic cells. J Natl Cancer Inst. 1984;73(6):1337-47.
[3] Osman IF, Baumgartner A, et al. Genotoxicity and cytotoxicity of zinc oxide and titanium dioxide in
HEp-2 cells. Nanomedicine (Lond). 2010;5(8):1193-203.
[4] 王源源等。苯酚致 V79 细胞毒性及 DNA 损伤效应的研究。工业卫生与职业病,2011;(2):78-81。
[5] Rowe RC, Sheskey PJ, et al. Handbook of Pharmaceutical Excipients (sixth edition).
Pharmaceutical Press. 2009; p485-6.
资料来源:BioGems
BioGems无血清细胞培养添加物 转铁蛋白和胰岛素
白蛋白、胰岛素和转铁蛋白等是无血清培养体系中细胞生长所必须的因子。
Biogems的人重组转铁蛋白和胰岛素生物活性与天然蛋白相同,批间稳定。这些蛋白由真核细胞重组表达,不含动物成分。质控严格,zui大程度地降低了污染的风险。
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PeproTech/
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10-366-1g
Recombinant Human Transferrin
重组人转铁蛋白
95%
1g/支
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10-365-1g
Recombinant Human Insulin
重组人胰岛素
95%
1g/支
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