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在显色培养基培养时经常会用到固体培养基，但是，在配制培养基过程中偶尔会出现不凝固、半凝固或者一摇晃培养基就破碎的现象，问题在哪里呢？
许多文献指出，琼脂的凝固程度主要受到PH值和琼脂含量的影响，PH值较低( 4.0)时，PH值是影响凝固等级的主要因素；PH值较高(5.0~8.0)时，琼脂浓度是影响凝固等级的主要因素。药典上培养基配方中明确规定了PH值和琼脂含量，如配制操作正常，凝固应是不会出现问题的。为此，我们针对培养基出现的凝固异常进行了分析及试验：
一、培养基PH值问题：培养基灭菌前后PH值有何变化？经查阅大量相关学术研究，不同培养基灭菌前后PH普遍有这样的变化超势：高压灭菌前pH值4.5-8.0的培养基灭菌后pH值变化较小，偏酸性的略上升，偏碱性的略下降。但酸性或碱性较强的培养基灭菌前后PH值变化较大。因我们常使用的培养基pH值均在4.5-8.0范围内，所以偶尔出现的培养基凝固不好应不是PH值影响的。
二、琼脂问题：琼脂是显色培养基zui常用的凝固剂，是一种海藻多糖，PH在4-10之间才会形成凝胶，且其凝胶强度和琼脂糖的浓度有关。目前我们实验室使用的均是成熟配方的培养基，为什么会偶尔出现凝固不好的现象呢？
我仔细核查了琼脂粉的生产厂家、批号、保质期及配制时的称量、溶解、定容和转移等过程。排除了琼脂粉质量问题，但发现培养基分装准备高温灭菌时，有部分经开水溶解的琼脂呈细小颗粒状沉在瓶底，即未完全溶解，后查阅资料发现，琼脂加热至95℃时才开始溶解，说明我们用热水溶解琼脂时，琼脂未能完全溶解，这可能是导致培养基难凝固的原因。于是我们在配制培养基时，先将琼脂煮沸5分钟后再分装、灭菌，zui后培养基冷却至40℃时能完全凝固。自琼脂溶解方式改变后，便未再出现培养基不凝固、半凝固或者一摇晃显色培养基就破碎的现象
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