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单抗技术是主要由抗原制备，免疫动物，细胞融合，筛选杂交瘤细胞，克隆化培养，单克隆抗体的大量制备与鉴定等一系列实验组成的实验系统，其核心部分是细胞融合。细胞融合是单克隆抗体技术的中心环节，基本步骤是将脾细胞和骨髓瘤细胞混合后加入PEG使细胞彼此融合。
实验原理:B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂；而骨髓瘤细胞可以在体外无限传代，但不能产生抗体。将这两种细胞融合后，用一特殊选择培养基（HAT）阻断正常细胞或自体融合细胞的DNA合成通路，而杂交瘤细胞可利用补救通路合成DNA得以生存，且既能产生抗体，又能无限增殖，并以此生产抗体的技术。
实验方法
材料：Balb/c小鼠，SP2/0骨髓瘤细胞，50%PEG，不完全培养液，HAT培养液，75%酒精，剪刀，镊子，纱布，离心管，网筛，大小瓶 皿，直头滴管，弯头滴管，瓶塞，培养瓶盖，离心管盖，烧杯（加入37℃水），泡沫板，大头针，96孔培养板，计时器，显微镜，计数板等。
单克隆抗体技术方法：
显微镜下观察血片或骨髓片，找出异常细胞。
（1）饲养细胞的制备
1.常用Balb/c小鼠，拉颈处死，浸泡于75%酒精内，3～5min。
2.用无菌剪刀剪开皮肤，暴露腹膜，剪一小口，用滴管注入5～6ml不完全培养液（严禁刺破肠管）。
3.反复冲洗，将冲洗液吸入15ml离心管，1000rpm5min离心，用完全培养液混悬，调整细胞密度。
（2）SP2/0骨髓瘤细胞的制备
1.选取状态良好、处于对数生长期的SP2/0骨髓瘤细胞。
2.弃去原瓶中培养上清，用不完全培养液冲洗三遍。
3.再以不完全培养液对细胞进行充分吹打，得到的细胞悬液移入15ml离心管。
4.细胞计数。
（3）脾细胞的制备
1.3天前加强免疫的小鼠，摘眼球取血后，拉颈处死，75％酒精浸泡3～5min。
2.将小鼠固定于泡沫板上，打开腹腔，取出脾脏，用不完全培养液反复冲洗。
3.在平皿中的网筛中，用镊子夹取脾脏进行反复研磨，边磨边滴加不完全培养液，直到脾细胞单个化，将细胞悬液转入15ml离心管中。
4.细胞计数。根据两种细胞计数结果，调整悬液用量，配平之后（SP2/0细胞与脾细胞数量比值在1：5～1：10之间），以1000rpm5min离心。
5.弃上清，每管加入5ml不完全培养液，吹打混匀后合并于同一15ml离心管中，再次以1000rpm5min。
6.离心，弃上清，用滴管吸净残留液体。
（4）细胞融合
1.前面步骤所得到的细胞沉淀，轻弹离心管管底，使其呈糊状。
2.在37℃水浴中，轻轻振荡，一边缓缓加入1mlPEG，边加边摇，PEG于1min内加完。
3.加完PEG之后，将悬液在37℃水浴中静置1min。
4.继续在37℃水浴中，边摇边加入不完全培养液2ml，于2min内加完。
5.慢慢加入不完全培养液，800rpm，8min。
6.弃上清，加入含1％HAT、20％FCS的培养液，轻轻混匀。
（5）在96孔细胞培养板中加入饲养细胞上清，1滴/孔；之后加入融合细胞悬液，1滴/孔。
（6）镜下观察96孔板中细胞情况，CO2孵箱中培养。
单克隆抗体技术实验结果计算:一只小鼠可获得（1～2.5） 108个脾细胞，与（2～3） 107个SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合。显微镜下可见单个分散的细胞，细胞培养3～5天后即可出现小克隆，杂交瘤细胞较大，呈圆形且透明，其它细胞透光性差并逐渐死亡。
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