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英国Bio安Rad可风双性恋通量电泳DGGEvs安景,可风,Bio安Rad,试验的设备vs储备讯息vs91化学工业仪器网

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放大字体  缩小字体    发布日期:2021-01-26  来源:仪器网  作者:Mr liao  浏览次数:79
核心提示:运用DGGE搜寻未知突变DGGE 是基于以下原理,即增加聚丙烯酰胺凝胶内变性剂的浓度会熔解双链DNA 的不同区域。当温度达到zui低熔解度区域的熔解温度Tm 时,DNA 部分熔解,在凝胶中形成迁移率

运用DGGE搜寻未知突变

DGGE 是基于以下原理,即增加聚丙烯酰胺凝胶内变性剂的浓度会熔解双链DNA 的不同区域。当温度达到zui低熔解度区域的熔解温度Tm 时,DNA 部分熔解,在凝胶中形成迁移率下降的分支分子(Myers et al.1987)。在均一的运行温度(50 65 C)和尿素与甲酰胺线性变性梯度条件下即形成了变性环境。梯度以垂直或平行于电泳方向形成。DGGE 是zui灵敏的突变检测方法,其效率可达99%(Grompe 1993)。DCode 系统通过以下途径优化DGGE:温度控制模块提供45 70 C 内的*运行温度系统可运行2 块16 x 16 cm 凝胶或4 块7.5 x 10 cm 凝胶可选择的MacMelt 或WinMelt 软件优化了GC 夹及引物的置放

DGGE 的两种模式。A ,凝胶的变性梯度方向与电泳方向垂直。从原生乳腺癌种扩增的p53 基因6 号外显子的野生型和突变型等位基因通过垂直DGGE(80V,56 C,2 小时)分离。感谢AL Borresen, Radium Hospital, Oslo, Norway 提供的数据。B ,凝胶的变性梯度方向与电泳方向平行。p53 基因8 号外显子的野生型和突变型等位基因在8%丙烯酰胺:甲叉37.5:1 平行梯度(40 65% 变性剂)凝胶上,1 x TAE 缓冲液, 60 C,150 V,电泳2.5 个小时。左泳道,突变型等位基因;中,野生型等位基因;右,突变型与野生型等位基因。

DGGE分离示意图。所示为一个变性梯度方向与电泳方向垂直的凝胶,以及一个有单个熔解区域的目标序列。野生型和突变型样品加入到制备孔内。在低变性剂浓度时,DNA的片段为双链,但当浓度增加时双链DNA 开始熔解,形成分枝分子。到浓度非常高时,DNA的片段可熔解形成2条单链。

运用DGGE搜寻未知突变

DGGE 是基于以下原理,即增加聚丙烯酰胺凝胶内变性剂的浓度会熔解双链DNA 的不同区域。当温度达到zui低熔解度区域的熔解温度Tm 时,DNA 部分熔解,在凝胶中形成迁移率下降的分支分子(Myers et al.1987)。在均一的运行温度(50 65 C)和尿素与甲酰胺线性变性梯度条件下即形成了变性环境。梯度以垂直或平行于电泳方向形成。DGGE 是zui灵敏的突变检测方法,其效率可达99%(Grompe 1993)。DCode 系统通过以下途径优化DGGE:温度控制模块提供45 70 C 内的*运行温度系统可运行2 块16 x 16 cm 凝胶或4 块7.5 x 10 cm 凝胶可选择的MacMelt 或WinMelt 软件优化了GC 夹及引物的置放

DGGE 的两种模式。A ,凝胶的变性梯度方向与电泳方向垂直。从原生乳腺癌种扩增的p53 基因6 号外显子的野生型和突变型等位基因通过垂直DGGE(80V,56 C,2 小时)分离。感谢AL Borresen, Radium Hospital, Oslo, Norway 提供的数据。B ,凝胶的变性梯度方向与电泳方向平行。p53 基因8 号外显子的野生型和突变型等位基因在8%丙烯酰胺:甲叉37.5:1 平行梯度(40 65% 变性剂)凝胶上,1 x TAE 缓冲液, 60 C,150 V,电泳2.5 个小时。左泳道,突变型等位基因;中,野生型等位基因;右,突变型与野生型等位基因。

DGGE分离示意图。所示为一个变性梯度方向与电泳方向垂直的凝胶,以及一个有单个熔解区域的目标序列。野生型和突变型样品加入到制备孔内。在低变性剂浓度时,DNA的片段为双链,但当浓度增加时双链DNA 开始熔解,形成分枝分子。到浓度非常高时,DNA的片段可熔解形成2条单链。

 
关键词: nbsp 凝胶 变性 DGGE 突变
 
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