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RACE实验原理
RACE 是采用PCR 技术由已知的部分cDNA 顺序来扩增出完整cDNA5 和3 末端,是一种简便而有效的方法, 又被称为锚定 PCR (anchoredPCR)和单边PCR(one2side PCR)。
3 RACE
利用mRNA的3 末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为锁定引物反转录合成标准*链cDNA.然后用一个基因特异引物GSP1（gene specific primer，GSP）作为上游引物，用一个含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为下游引物，以cDNA*链为模板，进行PCR循环，把目的基因3 末端的DNA片段扩增出来。
5 RACE
先利用mRNA的3 末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以Oligo（dT）30MN作为锁定引物在反转录酶MMLV作用下，反转录合成标准*链cDNA.利用该反转录酶具有的末端转移酶活性，在反转录达到*链的5 末端时自动加上3-5个（dC）残基，退火后（dC）残基与含有SMART寡核苷酸序列Oliogo（dG）通用接头引物配对后，转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头（见Figure 2 ）。然后用一个含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为上游引物，用一个基因特异引物2（GSP 2 genespecific primer，GSP）作为下游引物，以SMART*链cDNA为模板，进行PCR循环，把目的基因5 末端的cDNA片段扩增出来。最终，从2个有相互重叠序列的3 / 5 -RACE产物中获得全长cDNA，或者通过分析RACE产物的3 和5 端序列，合成相应引物扩增出全长cDNA。
实验流程：
1、总RNA提取以及cDNA反转录
2、根据已知序列设计引物，以cDNA模板进行扩增，验证序列正确性
3、RACE 扩增，并测序，使用锚定PCR（AnchoredPCR）与巢式PCR（Nested PCR）相结合的方法，分别进行3 末端和5 末端RACE并对其产物进行测序
4、根据测序结果拼接目的基因全长cDNA序列
5、将RACE产物进行TA克隆用于后续研究（可根据客户要求自行选择）
服务优势
采用进口试剂,确保实验准确性
较同类产品方法更快速，便捷
丰富的项目经验，超过500例的成功案例
提供全套的后续生物信息学分析服务（可根据客户要求提供个性化分析服务）
服务流程
1、确认客户提供的序列信息
2、评估RACE实验可行性
3、确认样本信息
4、根据客户提供的信息设计好实验方案，销售做出报价合同
4、客户确定无误后签订《沃森生物-RACE检测服务合同》，并签字（或盖章）
5、支付预付款，服务正式启动
6、根据合同实验方案开展实验
8、实验结束后，发送初步实验报告
9、支付实验尾款
10、提供详细实验报告，完成实验项目
材料提交说明
实验样品
1、组织或者细胞：提供尽可能多的新鲜组织或细胞样品(包括3个技术重复)，组织样品不少于200 mg，细胞至少107个
2、RNA样品：3 RACE：Total RNA 15 g；5 RACE：Total RNA 25 g（注：OD260/OD280在1.9-2.1之间，完整性好)
序列信息：
1、大于200bp的已知序列(请注明已知序列的5 端及3 端)：如果已知序列比较短，建议先进行3 RACE再进行5 RACE，以提高实验的成功率
2、实验数据和参考文献：这将会帮助我们更好地理解您的实验背景，有利于实验的顺利进行
结果交付
实验结题报告：包括实验步骤，引物信息，实验过程 PCR产物照片，全长序列拼接结果；
测序原始数据：测序彩色波形图、碱基序列图；
实验产物：引物、PCR产物、测序用质粒（限产生克隆测序的情况）。
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