一、旨在了解到红细胞枚举框的构造,握有采用和计算方法。二、科学仪器与材质显微、红细胞枚举框、移液管、细菌滴(准备好不见红皮书)。三、红细胞枚举框的构造和计算方法红细胞枚举框由木头比平常载玻片厚度的特制玻片材质。玻片和中央刻着四条筒,和中央两条筒间的三角形比其他三角形略低于,和中央有其余部分筒,筒的两端的三角形上各刻着9个大格子,和中央的一个大格子为枚举四楼,其长和高约各为1mm,厚度为0.1厚度,其尺寸为0.1mm3。枚举四楼有两种尺寸:一种是把大格子细分16中格,每三中格细分25盘上,总计400盘上;另一种尺寸是把大格子细分25中格,每三中格细分16盘上,总计也是400盘上。计算方法如下:1.16×25的枚举框之比蛋白将近/mg:100盘上内的蛋白将近/100×400×10×1000×挥发乘积。2.25×16的枚举框之比蛋白将近/mg:80盘上内的蛋白将近/80×400×10×1000×挥发乘积。四、操作步骤(1)挥发试样,为了便于枚举,将试样合理挥发,使每格左右含有5个蛋白。(2)收清洁的红细胞枚举框,用厚盖玻片露出和中央的枚举四楼,用移液管吸收少许必要摇匀的待测菌液于盖玻片的外缘,菌液则再行渗透枚举四楼,晾干5~10分钟需枚举。(3)将红细胞枚举框放置载物台上,用低倍光找寻小格子后换高倍光通过观察枚举。需要迅速高处、下旋动钝后座,以便见到枚举户外相同厚度的菌种。现以16×25尺寸的枚举板为例,将近四个角(从右上、从右上、从右下、从右下)的四个之中格(即100盘上)的细菌将近。如果是25×16尺寸的枚举框,除取四个角上三中极为,还取门楣的一个之中格(即80盘上)。对座落大格线上的细菌只计大格的顶部及右侧线上的细菌,或只计底部及左边线上的细菌。每个试样段落枚举3次,收平均数,便按关系式数值每毫升菌液中所含的细菌将近。(4)冲洗红细胞枚举框。采用再行后,将红细胞枚举框在水管上用喷出洗涤,务必用刀子洗清,洗完后再行蒸熟或用吹风机吹干。镜检,通过观察每盘上内应该有存留菌种或其他杂质。若不清洁,则需要段落冲洗至清洁为止。思考题1.结果:将结果历史记录于下表中。E指出5个之中格子之中的总菌数;C指出菌液挥发乘积。2.为什么用两种相同尺寸的枚举板测同一试样时,其结果一样?3.在枚举框枚举方式中之中,指明红细胞枚举框枚举的偏差主要来自哪些方面?应当如何尽可能减少偏差,以求正确?4.如何恰当采用枚举框枚举?其操作步骤和岗位理论是什么?如何开展数值?5.除枚举框可以开展病原体蛋白枚举以外,还有哪些新方法可以开展蛋白枚举?