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![]() 慢病毒包装原理 慢病毒表达质粒包含了包装、感染、稳定整合宿主细胞基因组所需的遗传信息,包装辅助质粒则提供了所有的转录、包装和重组假病毒所需要的辅助蛋白。为产出高滴度的病毒颗粒,通常将表达质粒和包装质粒共同转染至包装细胞中进行病毒的包装。包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外培养液中。通过收集含病毒颗粒的上清,进行浓缩和纯化可获得高纯度和高滴度的慢病毒。 慢病毒包装步骤 1、转染前1天,将293T细胞接种于10 CM培养皿中,加入15 mL含10%FBS的DMEM培养液,置37℃,5%CO2培养至约70-80%融合时,进行细胞转染。 2、转染293T细胞 (1)将慢病毒表达质粒和包装质粒加入到Opti-MEM中,混匀。 (2)将适量的Lipofectamine 2000 (invitrogen)加入到Opti-MEM中,混匀。 (3)5分钟后,将... [详细介绍] |